Johan II van Twickelo (ovl. 1500) was een Twentse edelman die tussen 1494 en 1500 drost van Twente was. Hij was heer van Twickel bij Delden. Door zijn huwelijk met Adriana van den Rutenberg kwamen haar voorouderlijke goederen in bezit van de Van Twickelo's.
Johan II van Twickelo was de oudste zoon van Johan I van Twickelo (-1449) en Jacopje van Keppel. Zijn zuster Maria van Twickelo (-1536) was gehuwd met Otto van den Rutenberg tot de Grimberg (-1524).
In of voor 1470 trouwde Johan II met Adriana van den Rutenberg (-1513) uit Dalfsen, dochter van Frederik van den Rutenberg en Agnes van Weerdenburg van Broeckhuijsen. Na het kinderloos overlijden van haar broers, kwamen de familiegoederen waaronder de havezate Rutenberg en de Hof te Hengelo in bezit van de Van Twickelo's.
vóór 1449 - 1500 (> 51 jaar)